PROGRAMA ESTATAL DE FOMENTO DE LA INVESTIGACIÓN CIENTÍFICA Y TÉCNICA DE EXCELENCIA, SUBPROGRAMA ESTATAL DE GENERACIÓN DEL CONOCIMIENTO. MINECO
Proyecto: BFU2016-79892-P. IPs: José de la Fuente y Margarita Villar
El Interactoma Subolesina/Akirina y su función en la regulación de la respuesta inmune en vectores invertebrados (garrapatas) y vertebrados (células humanas). SUBINTERACT
El objetivo a largo plazo de nuestro laboratorio es desarrollar metodologías para proteger a los humanos y animales contra la exposición a garrapatas y los patógenos que transmiten. Subolesina/Akirina (SUB/AKR) son proteínas ortólogas conservadas, recientemente descubiertas en invertebrados y vertebrados. Están involucradas en el control de la expresión génica a través de la interacción con otras proteínas reguladoras que afectan a la respuesta inmune, entre otras funciones. Anaplasma phagocytophilum se transmite por garrapatas del género Ixodes spp. e infecta granulocitos ocasionando enfermedades emergentes como la anaplasmosis granulocítica humana (HGA) y la fiebre transmitida por garrapatas (TBF) en rumiantes. En proyectos de investigación previos nuestro grupo caracterizó las interacciones garrapata – A. phagocytophilum descubriendo que SUB juega un papel importante en la respuesta inmune a la infección por patógenos. Recientemente hemos demostrado la participación de SUB en la regulación génica sugiriendo la existencia de una red regulatoria involucrada en la regulación cruzada entre NF-kB (Relish) y SUB y en la auto-regulación de SUB, con implicaciones en la respuesta inmune de la garrapata a la infección bacteriana. Además, hemos visto que SUB no se une directamente al ADN sino a través de la interacción con otras proteínas reguladoras. Sin embargo, la información sobre la respuesta inmune de las garrapatas y la composición y papel que el interactoma de SUB/AKR tiene en este proceso, es escasa. La respuesta inmune a la infección bacteriana se ha caracterizado mejor en humanos, pero la composición y papel del interactoma de AKR se desconoce. Nuestra hipótesis es que el interactoma de SUB/AKR es esencial en la regulación de la respuesta inmune frente a A. phagocytophilum tanto en garrapatas vectores como en células humanas. Así, el objetivo de este proyecto es caracterizar el interactoma de SUB/AKR y su papel en la regulación de la respuesta inmune en células de invertebrados (garrapatas) y vertebrados (humanas) infectadas con A. phagocytophilum.
Los objetivos concretos son:
- Definir el interactoma de SUB/AKR en células ISE6 (garrapata) y HL-60 (humanas) infectadas o no con A. phagocytophilum.
- Caracterizar los genes cuya expresión se ve afectada por la interacción SUB/AKR en dichas células.
- Caracterizar la interacción entre el complejo protéico SUB/AKR y las regiones promotoras de los genes regulados por estas proteínas.
- Caracterizar la función de las proteínas que interaccionan con SUB/ARK y los genes de respuesta inmune regulados por éstas en las células de estudio.
La caracterización del interactoma de SUB/ARK en células de garrapata y humanas hará avanzar en el conocimiento de la respuesta inmune frente a A. phagocytophilum a la vez que permitirá realizar un estudio comparativo entre las células de garrapatas y humanos mejorando la oportunidad de identificar proteínas en ambos organismos. Con esta investigación se pretende: (1) ofrecer un estudio exhaustivo de la regulación génica en el contexto de las interacciones patógeno-garrapata/hospedador, (2) generar las bases para la experimentación empírica con el fin de entender las similitudes y diferencias entre la respuesta inmune innata y los factores que conectan la fisiología y colonización microbiana de las células de garrapata y humanas y (3) desvelar dianas farmacológicas útiles para prevenir y/o controlar la HGA y otras enfermedades transmitidas por garrapatas.
